兔血清總補體elisa試劑盒操作步驟
更新時間:2023-06-07 瀏覽次數(shù):761
兔血清總補體ELISA試劑盒是常用于研究免疫系統(tǒng)的一種實驗技術,它是一種準確、可靠、靈敏的實驗技術,在臨床和科研領域得到了廣泛應用。
一、原理
ELISA是一種基于抗原-抗體反應的檢測技術,其中酶標記的二級抗體或親和素與分子之間形成復合物,通過底物酶反應生成熒光或吸光度信號。兔血清總補體ELISA試劑盒利用雙抗原夾心法檢測血清樣品中總補體含量。具體來說,首先將血清樣品加入含有植物血凝素的96孔板孔中固定;然后加入生物素標記的補體C3抗體,與未被固定的補體C3結合;最后加入辣根過氧化物酶標記的蛋白A,與生物素結合的抗體形成復合體。洗滌后加入底物TMB,產生藍色反應產物,加入停止劑停止反應,測定OD值,OD值與樣品中總補體含量呈正相關關系。
二、操作步驟
1、取出所需試劑和材料,標記試板。
2、加入樣品和對照物質。
3、加入生物素補體C3抗體(第一抗體)。
4、洗滌板子去除所有未結合的第一抗體。
5、加入辣根過氧化物酶標記的蛋白A(第二抗體)。
6、洗滌板子去除所有未結合的第二抗體。
7、加入底物TMB。
8、停止反應,并測定吸光度值。
三、兔血清總補體ELISA試劑盒具有以下優(yōu)點:
1、靈敏度高,可以檢測到極低濃度的總補體。
2、準確性高,結果穩(wěn)定可靠。
3、操作簡單,易于實驗室進行。
四、應用領域
兔血清總補體ELISA試劑盒廣泛應用于臨床醫(yī)學、生命科學和免疫學等領域。其中,最常見的應用是檢測患者血清中總補體含量,以診斷某些自身免疫性疾病,如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕性關節(jié)炎和其他結締組織病等。此外,該試劑盒還可以用于研究小鼠模型中的免疫反應,評估藥物對免疫系統(tǒng)的影響等方面。